發(fā)布成功
人工輔助生殖,是工程技術和臨床醫(yī)學技術的結(jié)合。臨床醫(yī)學的發(fā)展解決了生殖細胞的來源(主要是特定發(fā)育階段的人類卵母細胞來源、確認精子體外授精能力)問題,明確了妊娠的生理要素;工程技術解決了體外受精問題和受精卵體外培養(yǎng)過程模擬體內(nèi)環(huán)境的問題。這一技術系列存在體外培養(yǎng)環(huán)境對體內(nèi)環(huán)境模擬不完備的技術現(xiàn)實,以及在受精和培養(yǎng)過程中依賴人工操作和體外操作緩沖液體系統(tǒng)的問題,現(xiàn)在通用的ivf操作方法主要是培養(yǎng)箱外開放環(huán)境的手工操作,箱外操作脫離了培養(yǎng)環(huán)境,依賴緩沖液系統(tǒng),依賴培養(yǎng)環(huán)境外的溫度控制裝置,而且高度依賴操作人的操作技術和責任心,必須人工操作,操作環(huán)境的保持依賴特定的操作規(guī)則和設備,工作過程不可追溯,無法標準化。
ivf實驗室序列培養(yǎng)操作流程簡述如下(以第3日移植方式為例):依據(jù)手術計劃提前準備培養(yǎng)液;手術抽吸卵泡液,手術助手指示術者卵泡液容器(試管)是否需要更換,術者根據(jù)提示持續(xù)抽吸或者停止抽吸;卵泡液裝入試管后,手術助手放入恒溫試管架,更換新的試管容器,重復前述過程,直至術者結(jié)束抽吸,完成手術;實驗室操作人將包含卵丘復合物的卵泡液取出,完整轉(zhuǎn)移入撿卵容器,在低倍體視顯微鏡協(xié)助下快速識別卵丘細胞復合物,手工轉(zhuǎn)移入緩沖液體(緩沖液容器置放在恒溫平臺之上),手工沖洗后移入授精培養(yǎng)液(授精培養(yǎng)液容器放置在恒溫平臺之上),轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱環(huán)境,在規(guī)定的時間加入精子液滴(培養(yǎng)箱外),培養(yǎng)箱內(nèi)完成授精后在規(guī)定的時間手工脫除顆粒細胞(培養(yǎng)箱外),在培養(yǎng)箱外快速轉(zhuǎn)移受精卵到卵裂培養(yǎng)液,在規(guī)定的時間完成移植或凍融保存,也可以繼續(xù)培養(yǎng)到囊胚狀態(tài)后移植或凍融;如果操作人決定進行卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射授精,實驗室操作人須制作緩沖液液滴系統(tǒng),準備授精培養(yǎng)皿,在具有恒溫平臺裝置的倒置顯微鏡下完成顯微注射授精,然后將授精后的細胞手工轉(zhuǎn)移入培養(yǎng)皿(授精培養(yǎng)液滴),置入培養(yǎng)箱內(nèi),繼續(xù)培養(yǎng)。
這一工作體系中,培養(yǎng)液滴在開放環(huán)境和培養(yǎng)箱內(nèi)人工環(huán)境多次轉(zhuǎn)移,目標細胞也在不同的液體環(huán)境中多次轉(zhuǎn)移,細胞轉(zhuǎn)移依賴操作人手工完成(使用手持吸管工具手工操作單細胞,需嚴格避免氣泡產(chǎn)生等操作失誤),培養(yǎng)環(huán)境不連續(xù),也容易出現(xiàn)細胞丟失和損傷;這一工作體系中,細胞培養(yǎng)環(huán)境無法標準化,任意兩組細胞操作過程不能嚴格比較,任意兩組培養(yǎng)過程不能嚴格比較,操作過程無法監(jiān)控,只能從移植結(jié)果上判斷操作是否成功。
目前的工作規(guī)則下,臨床生殖實驗室胚胎培養(yǎng)和臨床移植的成功率與胚胎操作人的熟練程度和責任心直接相關,和實驗室的管理行為直接相關,這是各臨床生殖醫(yī)學單位和操作員的最終種植成功率表現(xiàn)出顯著差異的重要原因。合格的實驗室操作人,需要嚴格的操作培訓和長期、大量的練習,這一要求制約了IVF技術的進一步普及,并造成了社會資源的大量浪費。
完成卵泡液的抽吸和卵丘細胞復合物識別和撿拾是完成卵細胞授精和培養(yǎng)的前提。手工撿拾卵丘細胞復合物,操作人常常必須在壓力下工作,開放環(huán)境下淺液面的手工撿拾,要求快速識別和準確撿拾,某些狀態(tài)下,比如卵丘細胞復合物發(fā)育不良,體積過小而且折光不明顯,容易漏撿,發(fā)育不良的卵細胞,如果進行適當?shù)捏w外孵育,也可以具備正常受精能力;如果操作人操作技術不熟練或者心理狀態(tài)不佳,容易造成撿拾時間過長,細胞失溫;準確記錄獲卵結(jié)果,也可以為臨床過程提供支持數(shù)據(jù)。
本設計的目的是提供一種卵細胞自動識別分選裝置,能適用于自動識別分選出卵丘細胞復合物、卵細胞和早期受精卵的自動識別和分選,提高了細胞識別分選的精確度,減少了操作成本。依據(jù)卵細胞在卵泡液背景中特異的圖像形態(tài),本裝置能獲取全部發(fā)育狀態(tài)的卵細胞。
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